在光學(xué)顯微鏡下精確測量微生物的大小,主要依賴于目鏡測微尺這一工具,并遵循一系列嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮鞑襟E。以下是詳細(xì)的測量步驟:
一、校正目鏡測微尺
準(zhǔn)備工具:
已知長度的鏡臺測微尺:用于校正目鏡測微尺。
目鏡測微尺:安裝在顯微鏡的目鏡上,用于測量微生物的大小。
校正過程:
將鏡臺測微尺放在顯微鏡的載物臺上,并使其刻度朝上。
將目鏡測微尺放入目鏡內(nèi),并調(diào)整顯微鏡,使目鏡測微尺與鏡臺測微尺的刻度線重合。
觀察并記錄鏡臺測微尺上某一長度(如10格)在目鏡測微尺上對應(yīng)的格數(shù)。
根據(jù)已知鏡臺測微尺的長度和目鏡測微尺上的格數(shù),計算出目鏡測微尺每格所代表的實際長度,即校正值。
這個過程需要在低倍鏡、高倍鏡及油鏡下分別進(jìn)行,因為不同放大倍數(shù)下,目鏡測微尺的每格長度會有所不同。
二、制備微生物樣本
取樣:從待測微生物群體中隨機(jī)選取一定數(shù)量的樣本。
制片:將樣本制成水浸片或染色涂片,并放置在顯微鏡的載物臺上。
三、測量微生物大小
調(diào)焦與定位:
使用顯微鏡的低倍鏡先找到微生物的視野。
然后逐漸轉(zhuǎn)換到高倍鏡或油鏡,并調(diào)整焦距使微生物圖像清晰。
測量:
使用目鏡測微尺測量微生物的寬度和長度。在測量時,應(yīng)注意微生物的形態(tài)可能因放大倍數(shù)而有所變化,因此需要在同一放大倍數(shù)下進(jìn)行測量。
記錄每個微生物的寬度和長度所對應(yīng)的目鏡測微尺格數(shù),并乘以相應(yīng)的校正值,得到微生物的實際寬度和長度。
重復(fù)測量:為了提高測量的準(zhǔn)確性,通常需要測量多個(如10個)微生物樣本,并計算其平均值作為Z終結(jié)果。
四、注意事項
在測量過程中,應(yīng)確保顯微鏡的放大倍數(shù)、焦距等參數(shù)保持不變,以避免測量誤差。
對于形態(tài)不規(guī)則的微生物,應(yīng)選擇合適的測量方法和參數(shù)進(jìn)行描述和記錄。
在使用油鏡時,應(yīng)注意鏡頭的保護(hù)和清潔,避免鏡頭與玻片相撞或污染。
通過以上步驟,可以在光學(xué)顯微鏡下精確測量微生物的大小,為微生物學(xué)研究和應(yīng)用提供可靠的數(shù)據(jù)支持。同時,需要注意的是,不同的微生物測量方法和儀器有其優(yōu)缺點(diǎn),可以根據(jù)需要進(jìn)行選擇。