光學顯微鏡重要的技術參數(shù)主要包括以下幾個方面:
一、數(shù)值孔徑(NA)
定義:數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術參數(shù),是判斷兩者(尤其對物鏡而言)性能高低的重要標志。其數(shù)值的大小,分別標刻在物鏡和聚光鏡的外殼上。數(shù)值孔徑(NA)是物鏡前透鏡與被檢物體之間介質的折射率(n)和孔徑角(u)半數(shù)的正弦之乘積。
影響:
數(shù)值孔徑與顯微鏡的放大率成正比,數(shù)值孔徑越大,放大率越高。
數(shù)值孔徑與顯微鏡的分辨率成正比,數(shù)值孔徑越大,分辨率越高。
數(shù)值孔徑與顯微鏡的景深成反比,數(shù)值孔徑越大,景深越小。
數(shù)值孔徑的平方與圖像亮度成正比,數(shù)值孔徑越大,圖像越亮。
二、分辨率
定義:分辨率又稱“鑒別率",是衡量顯微鏡性能的一個重要技術參數(shù)。它是指能被顯微鏡清晰區(qū)分的兩個物點的Z小間距。
影響因素:
物鏡的數(shù)值孔徑:數(shù)值孔徑越大,分辨率越高。
照明光源的波長:波長越短,分辨率越高。
三、放大率
定義:放大率是指被檢驗物體經(jīng)物鏡放大再經(jīng)目鏡放大后,人眼所看到的Z終圖像的大小對原物體大小的比值。
注意事項:
放大率并不是越高越好,當選用的物鏡數(shù)值孔徑不夠大,即分辨率不夠高時,顯微鏡不能分清物體的微細結構,此時即使過度地增大放大倍率,得到的也只能是一個輪廓雖大但細節(jié)不清的圖像,稱為無效放大倍率。
顯微鏡總的放大率是物鏡放大率和目鏡放大率的乘積。
四、視場
定義:觀察顯微鏡時,所看到的明亮的圓形范圍叫視場。它的大小是由目鏡里的視場光闌決定的。視場直徑也稱視場寬度,是指在顯微鏡下看到的圓形視場內所能容納被檢物體的實際范圍。
影響因素:
視場直徑與視場數(shù)成正比。
增大物鏡的倍數(shù),則視場直徑減小。
五、景深
定義:景深為焦點深度的簡稱,即在使用顯微鏡時,當焦點對準某一物體時,不僅位于該點平面上的各點都可以看清楚,而且在此平面的上下一定厚度內,也能看得清楚。這個清楚部分的厚度就是景深。
影響因素:
景深與總放大倍數(shù)及物鏡的數(shù)值孔徑成反比。
景深大,分辨率降低。
六、工作距離
定義:工作距離也叫物距,即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。
影響因素:
在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下,工作距離短則孔徑角大。
使用較大數(shù)值孔徑的物鏡時,工作距離較小。
七、機械筒長
定義:機械筒長是顯微鏡的一個重要結構參數(shù),它是指從顯微鏡物鏡的轉換板面到目鏡接管面之間的距離。
意義:機械筒長決定了顯微鏡能否安裝各種長度的物鏡和目鏡,以及能否進行各種形式的觀察和攝影。
綜上所述,光學顯微鏡的技術參數(shù)之間相互聯(lián)系又相互制約,在使用時需要根據(jù)鏡檢的目的和實際情況來協(xié)調參數(shù)間的關系。