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技術(shù)文章

熒光顯微鏡的使用方法說明

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熒光顯微鏡是利用一個高發(fā)光效率的點光源,經(jīng)過濾色系統(tǒng)發(fā)出一定波長的光作為激發(fā)光,激發(fā)標本內(nèi)的熒光物質(zhì)發(fā)射出各種不同顏色的熒光后,再通過物鏡和目鏡的放大進行觀察的一個儀器。熒光顯微術(shù)是生物,醫(yī)學中的重要研究手段,如對生物組織、生理、病理、微生物、醫(yī)藥、食品、化學等諸方面的鑒定等。
 
熒光顯微鏡也是光學顯微鏡的一種,與普通光學顯微鏡主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。
 
熒光顯微鏡的使用方法:
 
(1)打開燈源,超高壓汞燈要預熱15min才能達到亮點。
(2)透射式熒光顯微鏡需在光源與暗視野聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾片,在物鏡的后面裝上相應(yīng)的壓制濾片。落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾片、雙色束分離器、壓制濾片的插塊。
(3)用低倍鏡觀察,根據(jù)不同型號熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)裝置,調(diào)整光源中心,使其位于整個照明光斑的中央。
(4)放置標本片,調(diào)焦后即可觀察。使用中應(yīng)注意:未裝濾光片不要用眼直接觀察,以免引起眼的損傷;用油鏡觀察標本時,必須用無熒光的特殊鏡油;高壓汞燈關(guān)閉后不能立即重新打開,需待汞燈*冷卻后才能再啟動,否則會不穩(wěn)定,影響汞燈壽命。
(5)觀察。例如:在熒光顯微鏡下用藍紫光濾光片,觀察到經(jīng)0.01%吖啶橙熒光染料染色的細胞,細胞核和細胞質(zhì)被激發(fā)產(chǎn)生兩種不同顏色的熒光(暗綠色和橙紅色)。
 

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